转化生长因子-β1诱导小鼠足细胞凋亡实验研究

目的探讨转化生长因子-β1（TGF-β1）是否能诱导小鼠足细胞株凋亡以及诱导凋亡的途径。方法（1）体外培养小鼠足细胞株;（2）应用不同浓度(10-110+ng/L)TGF-β1诱导小鼠足细胞凋亡;（3）10～3ng/L TGF-β1诱导不同时间（12、24、48h）后观察足细胞凋亡情况;（4）采用流式细胞仪检测Annexin V、Caspase 3;（5）实时定量PCR及Western印迹法检测p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）、Smad2、Smad3、Smad7mRNA及蛋白质的表达情况。结果（1）小鼠足细胞在不同浓度(10-110～4ng/L)TGF-β1刺激下,细胞凋亡率明显高于正常对照组（均P<0.05）;（2）随着TGF-β1浓度增加、凋亡时间增加,足细胞凋亡率增高（P<0.05）;p38MAPK、Smad2、Smad3、Smad7 mRNA表达增加;TGF-β110～3ng/L为最佳诱导小鼠足细胞凋亡浓度,24h为最佳诱导凋亡时间;（3）与正常对照组比较,10～3ng/LTGF-β1诱导后Caspase 3阳性细胞比率显著增加（P<0.01）,p38MAPK、Smad2、Smad3、Smad7蛋白质表达亦显著增加（P<0.01）。结论 TGF-β1能诱导小鼠足细胞凋亡,呈浓度及时间依赖性。TGF-β1通过Smad通路、p38MAPK通路以及线粒体通路诱导小鼠足细胞凋亡。