吴茱萸碱抑制Wnt通路诱导人胰腺癌细胞凋亡和自噬的作用研究

目的探讨吴茱萸碱诱导人胰腺癌细胞株Bx PC-3和PANC-1凋亡和自噬的作用机制。方法不同浓度吴茱萸碱干预胰腺癌细胞株Bx PC-3和PANC-1后,用甲基三氯硅烷(MTS)法检测吴茱萸碱对胰腺癌细胞增殖的影响,并用流式细胞术检测细胞凋亡情况。用蛋白质印记试验(Western blot)检测凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、自噬相关蛋白胞浆型(LC3-Ⅰ)和膜型(LC3-Ⅱ),以及Wnt通路下游靶分子c-Myc、细胞周期素D1(Cyclin D1)的表达水平。结果 MTS实验结果显示2μmol/L的吴茱萸碱干预48 h后的胰腺癌细胞株Bx PC-3和PANC-1的存活率分别为(68.13±0.79)%和(57.19±1.47)%,明显低于未干预的胰腺癌细胞株,差异均有统计学意义(t分别=31.45、21.65,P均<0.05)。4μmol/L的吴茱萸碱干预48 h后的胰腺癌细胞株Bx PC-3和PANC-1的存活率分别为(55.07±1.97)%和(50.32±0.86)%,也低于2μmol/L吴茱萸碱干预的胰腺癌细胞株,差异均有统计学意义(t分别=6.13、4.02,P均<0.05)。2μmol/L吴茱萸碱干预的Bx PC-3和PANC-1胰腺癌细胞株凋亡率分别为(11.37±0.36)%和(11.36±0.32)%,明显高于未干预的胰腺癌细胞株Bx PC-3和PANC-1凋亡率(4.60±0.90)%和(4.00±0.86)%,两组之间,差异有统计学意义(t分别=8.27、10.14,P均<0.05)。2μmol/L吴茱萸碱干预的Bx PC-3和PANC-1胰腺癌细胞株较未干预的胰腺癌细胞株凋亡蛋白Bcl-2表达明显下降,Bax表达明显增加;LC3-Ⅱ/LC-3Ⅰ比值分别为对照组的2.5倍和6.4倍;Wnt通路下游靶分子c-Myc和Cyclin D1的表达均明显降低。结论吴茱萸碱能够通过抑制Wnt通路的活性诱导胰腺癌细胞凋亡和自噬。