重组人凋亡诱导因子基因的构建、表达及其对HeLa细胞的促凋亡作用

被引:15
作者
于翠娟
孟艳玲
桂俊豪
赵晶
金明
王智
王成济
杨安钢
机构
[1] 第四军医大学生物化学与分子生物学教研室
[2] 第四军医大学生物化学与分子生物学教研室 西安
[3] 西安
基金
国家杰出青年科学基金;
关键词
AIF; 细胞凋亡; 融合蛋白; HeLa细胞;
D O I
暂无
中图分类号
Q255 [细胞的衰老与死亡];
学科分类号
071003 [生理学];
摘要
凋亡诱导因子 (apoptosis inducingfactor ,AIF)定位于细胞的线粒体膜间隙 .当凋亡信号刺激时 ,AIF分子从线粒体释放到胞浆 ,然后转位到细胞核内 ,引起染色体核周边凝集和DNA呈大片段断裂 (~ 5 0kb) .用RT PCR法分段克隆得到人全长AIF基因 ,经改造截去其N端线粒体定位信号编码序列 ,代之以不同长度的绿脓杆菌外毒素 (PE)转膜结构域序列 .把这些重组基因克隆入 pIRES2 EGFP真核表达载体 ,脂质体法转染HeLa细胞 ,通过荧光显微镜观察、共聚焦显微镜观察、电镜观察等方法检测了多种重组人AIF基因的表达及其对细胞生长的影响 .证明了重组人AIF基因的表达可引起HeLa细胞死亡 ,为肿瘤的杀伤提供了新的策略
引用
收藏
页码:915 / 921
页数:7
相关论文
empty
未找到相关数据