启动子区甲基化对miRNA-122表达及肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨DNA甲基化对肝特异性miRNA 122表达调控以及肝癌细胞增殖和凋亡的影响。方法甲基化测序检测肝细胞中miRNA 1 22启动子区的甲基化状态。实时定量PCR检测肝细胞中miRNA-122表达水平。流式细胞仪与CCK8检测去甲基化对肝癌细胞增殖和凋亡的影响。结果与人原代正常肝细胞[(21.9±11.4)%]比较,Huh7、HepG2、QSG-7701细胞系miRNA 122启动子区的甲基化程度[分别为(87.6±9.3)%、(89.0±14.3)%、(69.5±11.5)%],均明显升高(P=0.000),尤其以Huh7、HepG2两种癌细胞系升高最为明显。与人原代正常肝细胞[(2.83×10～4±3746)]比较,三种细胞系miRNA 1 22的表达明显下降,其中以Huh7和HepG2两种癌细胞系降低最明显(P=0.007)。与空白对照比较,在10μmol/L的5氮杂2′-脱氧胞苷作用下,Huh7和HepG2两种癌细胞系甲基化程度明显降低(P=0.038,0.025);而其miRNA-122表达明显升高(P=0.008,0.003)。与空白对照组比较,Huh7细胞与HepG2细胞经去甲基化处理后细胞的凋亡均明显增加(P=0.001,0.027)。结论肝特异性miRNA-122的表达受DNA甲基化的明显调控,且与肝癌细胞的凋亡密切相关。miRNA-122的甲基化调控可能参与了肝癌的发生和发展。