组织型纤溶酶原激活剂重组变异体(Reteplase)的克隆表达和分离纯化

被引:5
作者
赵友春
王革
孔扬
薛峰
张长铠
机构
[1] 山东大学生命科学学院微生物技术国家重点实验室
[2] 山东元隆生物技术有限公司济南留学生创业园
[3] 山东大学生命科学学院微生物技术国家重点实验室 山东 济南
[4] 山东 济南
[5] 东元隆生物技术有限公司济南留学生创业园
关键词
组织型纤溶酶原激活剂; 克隆表达; 分离纯化;
D O I
暂无
中图分类号
Q78 [基因工程(遗传工程)];
学科分类号
071007 ; 0836 ; 090102 ;
摘要
从人脑cDNA文库中经PCR扩增得到组织型纤溶酶原激活剂重组变异体(reteplase,简称r PA,中文名称:瑞替普酶)的cDNA,经测序确证,克隆于表达载体pET22b,转化大肠肝菌BL21进行重组表达.表达的r PA占菌体总蛋白的40%,以包涵体形式存在.经过亲和层析和离子交换层析等纯化步骤后,得到纯度高于99%,比活性高于5×105IU/mg的r PA.对纯化的r PA进行了westernblot,N端氨基酸序列、氨基酸组成、质谱分析等测定.动物血栓模型实验表明:r PA具有较好的溶血栓作用.
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页数:5
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[1]   重组瑞替普酶对犬冠脉血栓的溶栓作用研究 [J].
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孔扬 ;
张长铠 ;
赵专友 .
中国生化药物杂志, 2002, (06) :281-283
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