磷脂酰肌醇-3激酶不直接调控PC12细胞的分泌

被引：1

作者：

刘媛媛

赵平

吴政星

瞿安连

徐涛

机构：

[1] 华中科技大学生命科学与技术学院生物物理与生物化学研究所

[2] 华中科技大学生命科学与技术学院生物物理与生物化学研究所武汉

[3] 武汉

来源：

生物化学与生物物理进展 | 2005年 / 08期

关键词：

磷酸酰肌醇-3激酶; 渥曼青霉素; PC12细胞; 分泌动力学; 钙依赖性; 钙离子光解释放技术; EGFP-2xFYVE融合蛋白;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q26 [细胞生物化学];

学科分类号：

071009 ; 090102 ;

摘要：

磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)是磷脂酰肌醇代谢过程中一种重要的酶,通过其代谢产物参与了对多种细胞生理活动的调节,如囊泡运输、细胞骨架重组、细胞存活、吞噬作用、细胞凋亡等.为研究其对细胞分泌功能的作用,使用磷脂酰肌醇-3激酶家族的特异性抑制剂渥曼青霉素(wortmannin)阻断磷脂酰肌醇-3激酶的活性,以EGFP-2xFYVE融合蛋白与磷脂酰肌醇-3-磷酸(PtdIns-3-P)的结合为指征,使用荧光显微成像技术检测渥曼青霉素对磷脂酰肌醇-3激酶的抑制作用,采用膜片钳膜电容测量方法及光解钙离子释放技术检测渥曼青霉素对PC12细胞分泌功能的影响.实验结果表明,wortmannin阻断了磷脂酰肌醇-3激酶的活性,抑制了磷脂酰肌醇-3-磷酸(PtdIns-3-P)的产生,并使FYVE与PtdIns-3-P解离,但渥曼青霉素处理之前和处理30min后的PC12细胞分泌反应的幅度、动力学特性和分泌的钙依赖性均无显著差异,表明磷脂酰肌醇-3激酶对PC12细胞的分泌无显著的直接影响.

引用

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