低氧激活巨噬细胞内NF-κB信号转导通路的机制

被引:7
作者
张翠萍
谢印芝
陈鹏
洪欣
肖忠海
马燕
吕永达
机构
[1] 军事医学科学院卫生学环境医学研究所,军事医学科学院卫生学环境医学研究所,军事医学科学院放射医学研究所,军事医学科学院卫生学环境医学研究所,军事医学科学院卫生学环境医学研究所,军事医学科学院卫生学环境医学研究所,军事医学科学院卫生学环境医学研究所天津,天津,北京,天津,天津,天津,天津
关键词
低氧; 巨噬细胞; 活性氧; 核因子κB;
D O I
暂无
中图分类号
R392 [医学免疫学];
学科分类号
100102 ;
摘要
利用离体培养的巨噬细胞(macrophage)低氧培养模型(1%O2,5%CO2),采用2’,7’-二氯荧光乙酰乙酸盐(2’,7’-dichlorofluorescein diacetate,DCFH-DA)荧光分光光度法、Western blotting法和逆转录酶链反应(reverse transcription polymerasechain reaction,RT-PCR)法,观察低氧后细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平、IκBα的酪氨酸(Tyr)磷酸化水平、P65mRNA转录水平以及细胞核内NF-κB(nuclear factor kappa B)激活量的变化,探讨低氧激活NF-κB信号转导通路的机制。结果表明,低氧后细胞内ROS水平、IαBα的Tyr磷酸化水平和细胞核内NF-κB的激活量均高于对照组(P<0.05),并且有时间变化趋势上的先后关系,如先用抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC,500 μmol/L)和Tyr蛋白激酶抑制剂genistein(200μmol/L)预处理,低氧后细胞内IκBα的Tyr磷酸化和NF-κB;活化分别比单纯低氧组下降(P<0.01);另外,低氧后P65 mRNA转录水平也明显增加(P<0.01)。以上结果提示,低氧可能通过细胞内产生ROS,使IκBα的Tyr位点磷酸化,进而使NF-κB活化;另外,NF-κB活性调节除受抑制性亚基IκBα的磷酸化调控外,还可能表现在NF-κB分子各亚基基因自身的转录调控上。
引用
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