中华眼镜蛇神经毒素cDNA的克隆及表达(英文)

被引：3

作者：

钟晓燕

潘华

吴俊

杨冠珍

吴祥甫

周元聪

机构：

[1] 中国科学院上海生物化学研究所!上海

来源：

生物化学与生物物理学报 | 2000年 / 01期

关键词：

神经毒素; 表达; 克隆;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q785 [转化及克隆];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

通过ＲＴＰＣＲ的方法，从广西产中华眼镜蛇总ＲＮＡ中克隆到３个新的神经毒素ｃＤＮＡ序列，命名为ＮＬ１、ＮＬ２和ＮＬ３。它们编码的蛋白质序列与台湾眼镜蛇神经毒素ｃｏｂｒｏｔｏｘｉｎ的同源性分别为７７％、７２％和９８％，均具有维持ｃｏｂｒｏｔｏｘｉｎ结构与功能必需的残基Ｔｙｒ２５、Ｌｙｓ２７、Ｔｒｐ２９、Ａｒｇ３３和Ｌｙｓ４７。ＮＬ３克隆于ｐＥＴ２８ｂ＋表达载体内，转化至ＢＬ２１（ＤＥ３）中表达，表达产物为包含体，经过一步亲和纯化可达９０％的纯度。每升培养基可得到６ｍｇ的蛋白质。纯化的蛋白质经体外变复性有小鼠致死毒性，毒性比天然ｃｏｂｒｏｔｏｘｉｎ小。

引用

页码：90 / 93

页数：4

共 3 条

[1] 江浙蝮蛇毒酸性磷脂酶A2基因的表达附视频 [J].

刘小龙 ;

潘华 ;

杨冠珍 ;

吴祥甫 ;

周元聪 ;

蔡明德 .

生物化学与生物物理学报, 1998, (04) :85-89

[2]

The analgesic activity of crotamine, a neurotoxin from Crotalus durissus terrificus (South American rattlesnake) venom: A biochemical and pharmacological study[J] . Toxicon . 1998 (12)

[3]

Four new postsynaptic neurotoxins from Naja naja sputatrix venom: cDNA cloning, protein expression, and phylogenetic analysis[J] . Fatemeh Afifiyan,Arunmozhiarasi Armugam,Ponnampalam Gopalakrishnakone,Nget Hong Tan,Chee Hong Tan,Kandiah Jeyaseelan.Toxicon . 1998 (12)

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