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嗜肺军团菌mip/ctxB融合基因体外表达与动物免疫试验的免疫原性研究附视频
被引：5
作者：
王涛
陈建平
郅克谦
陶大昌
杨春蕾
张雷
机构：
[1] 四川大学华西医学中心基础医学与法医学院寄生虫学教研室
[2] 西安交通大学口腔医学院颌面外科
[3] 四川大学华西医院
[4] 四川大学生命科学院医学细胞生物学教研室
[5] 大理学院微生物学教研室 成都
[6] 成都
[7] 西安
[8] 大理
来源：
关键词：
嗜肺军团菌;
霍乱弧菌;
mip/ctxB融合基因;
体外表达;
免疫原性;
D O I：
暂无
中图分类号：
R392 [医学免疫学];
学科分类号：
100102 ;
摘要：
PCR扩增嗜肺军团菌mip基因和霍乱弧菌ctxB基因,克隆入载体pcDNA3 1( +),重组子经限制性酶切分析、PCR、序列分析鉴定正确后,命名为pcDNA3 1 mip/ctxB.脂质体法将重组质粒pcDNA3 1 mip、pcDNA3 1 mip/ctxB转染NIH3T3细胞,用免疫荧光法和蛋白质印迹鉴定瞬时表达和稳定表达产物,结果发现:重组质粒成功转入细胞并获得短暂表达,稳定转染细胞分别在 2 4ku和 35ku处检测到阳性杂交信号.将pcDNA3 1 mip、pcDNA3 1 mip/ctxB作为DNA疫苗免疫BALB/c小鼠,检测免疫小鼠体内抗原特异性抗体水平、脾淋巴细胞增殖活性、IFN γ产生水平、细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性等体液免疫和细胞免疫反应的指标,评价疫苗的免疫原性.结果发现:各实验组均检测到免疫原性,pcDNA3 1 mip/ctxB免疫组的免疫原性高于pcDNA3 1 mip免疫组,有显著性差异(P <0 0 1).研究结果为mip/ctxB融合基因DNA疫苗的研制提供了初步的实验依据
引用
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页数：6
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