纤维蛋白酶谱检测蚯蚓纤溶酶组分

被引:6
作者
武金霞
赵晓瑜
机构
[1] 河北大学生命科学学院,河北大学生命科学学院河北保定,河北保定
关键词
酶谱; 蚯蚓纤溶酶; 纤维蛋白; 聚丙烯酰胺凝胶电泳;
D O I
暂无
中图分类号
R927 [药物鉴定];
学科分类号
100705 [微生物与生化药学];
摘要
目的建立鉴定蚯蚓纤溶酶粗酶液中活性组分的方法。方法根据蚯蚓纤溶酶能水解纤维蛋白的性质,建立了纤维蛋白-十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(Fibrin-SDS-PAGE),优化了电泳条件,电泳后酶所在部位为透明区带。结果分离胶中纤维蛋白终质量浓度为0.4×10-3mg·L-1,电泳后胶板用2.5%TritonX-100复性30min,PBS缓冲液(pH7.2)保温30min,考马斯亮蓝R-250染色,7%醋酸脱色,可以得到清晰的酶谱。结论该方法灵敏度高,用2μg样品,就能准确检测出粗酶液中所有纤溶酶组分。
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