肿瘤基质血管内皮细胞模型的建立及生物学特性研究

目的建立肿瘤基质血管内皮细胞模型并探讨其生物学特性。方法用人卵巢癌细胞SKOV3培养上清液诱导人内皮细胞ECV304,获得能稳定生长的ECV304-SKOV3细胞。观察其形态改变,检测其生长情况,免疫细胞化学测定其增殖细胞核抗原(PCNA)、bcl-2、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、粘合素(TN)表达变化,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定其端粒酶活性,并分析其核型、蛋白合成能力、对常用抗癌药物的反应性。结果ECV304-SKOV3细胞出现畸形核、有微绒毛的腔隙,染色体众数略有增加。细胞群体倍增时间较亲代细胞ECV304缩短;分裂指数增高;表达PCNA、bcl-2、MMP-9增强(t≥2.4671,P<0.05),而TN减弱(t=2.2473,P<0.05);S期细胞数增加,G0/G1期细胞数减少(χ2=923.313,P<0.01),增殖指数(PI)明显增高(χ2=570.197,P<0.01)。对作用于S期或S期和M期的抗癌药物较ECV304敏感,且与SKOV3癌细胞一致(F≥24.14,P<0.01)。蛋白质合成能力增强(t=-12.2465,P<0.001)。端粒酶活性强于亲代细胞ECV304(t=-25.2990,P<0.001)。结论ECV304-SKOV3细胞较亲代细胞ECV304增殖快,核型发生变化,存活能力强,功能活跃,某些血管形成因子表达增强,具有肿瘤基质血管内皮细胞的某些特性,可作为肿瘤基质血管内皮细胞模型用于进一步研究。