荧光法测定生物样品中维生素E的某些干扰因素附视频

本文讨论了肝组织和血清中维生素E含量测定过程中皂化条件和维生素A对测定结果的影响。 (1)皂化时KOH用量与测定时生育酚乙酸盐含量的关系:观察到用10NKOH0.5ml皂化时,测定管中纯生育酚乙酸盐的量在0.5-100μg之间与其荧光强度呈线性关系;大于150μg时,荧光强度不随其量增加。当测定管中仅有5μg纯生育酚乙酸盐时,10NKOH的用量加到3ml不影响结果。 (2)样品量对皂化效果的影响,用10NKOH0.5ml皂化时:肝组织的用量不得超过0.1g,否则结果会偏低。测定血清时,由于其中的维生素E主要是游离型的,无须皂化。有时皂化反而造成结果降低。 (3)维生素A对维生素E含量测定的干扰:维生素A有“熄灭荧光”的作用,本研究中观察到2μg维生素E中若有0.5IU以上的维生素A时,荧光强度显著下降。在苹取维生素E已烷液中加60％硫酸0.6ml可消除其影响。但硫酸加到1.5ml时也会使结果偏低,故在用硫酸消除维生素A干扰时,也应注意硫酸用量。