双歧杆菌对肠上皮细胞生长和白介素-8分泌功能的影响

目的探讨双歧杆菌对人肠上皮细胞株HT29生长及其IL-8分泌水平的影响。方法HT29细胞在96孔板上生长24 h后分为正常细胞对照组、高剂量双歧杆菌共培养组(细菌终浓度为1×1010CFU/ml)、低剂量双歧杆菌共培养组(细菌终浓度为1×106CFU/ml)、轮状病毒感染对照组,分别加入不同剂量双歧杆菌和感染轮状病毒共培养,继续培养24 h,光镜下观察细胞生长状态,MTT比色法检测细胞活性情况,ELISA检测细胞培养上清中IL-8表达水平。结果光镜下观察到双歧杆菌与HT29细胞共培养后细胞形态无明显改变,共培养24 h后MTT检测双歧杆菌对HT29细胞增殖和调亡无明显影响,但轮状病毒感染对照组细胞病变脱落,活细胞数量明显减少。共培养6 h,其余3组细胞培养上清中IL-8分泌较正常细胞对照组增加(P<0.05),高剂量双歧杆菌组增加较低剂量双歧杆菌组差异有显著性(P<0.05),但两个剂量组均明显低于轮状病毒感染阳性对照组的IL-8分泌增加水平(P<0.05);感染后24 h,细胞培养上清中IL-8分泌水平高于正常细胞对照组(P<0.05),但高、低剂量双歧杆菌组之间差异无显著性(P>0.05),两个剂量组IL-8分泌增加水平均明显低于轮状病毒感染阳性对照组(P<0.01)。结论两歧双歧杆菌共培养不影响HT29细胞的生长,双歧杆菌能够促进HT29细胞分泌细胞因子IL-8,但明显低于致病微生物刺激引起的细胞因子分泌水平改变,这种促进作用无时间—剂量依赖关系,提示双歧杆菌与肠道内致病微生物对肠道免疫功能的影响不同,双歧杆菌促进肠上皮细胞分泌IL-8可能与其参与的肠道黏膜免疫系统发育成熟相关。