不同抗原性甲3(H3N2)亚型流感病毒的鉴定及分子生物学研究

目的　对不能用当年标准血清进行鉴定的甲 3 (H3N2 )亚型流感病毒进行抗原性分析及分子生物学研究。方法　用交互血凝抑制试验对毒株进行抗原性分析 ,提取病毒RNA ,用一步法逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)扩增HA1 (血凝素重链区 )基因片段 ,产物纯化后测序并分析结果。结果发现两株从鸡胚分离到的甲 3 (H3N2 )亚型“D”相毒株与 2株从MDCK细胞分离到的“O”相毒株抗原性已明显不同 ;其中 1 999年分离的“D”相与“O”相 2毒株的抗原比大于 2 56,氨基酸序列同源性为 93 % ,抗原决定簇A区和B区氨基酸位点相差分别为 50 %及 3 5% ;受体结合部位 (RBS)有 6个氨基酸位点发生变异 (左侧壁 1个、前壁 3个、右壁 2个 )。结论　人群中存在没有发生“O”相变异的甲 3 (H3N2 )亚型“D”相毒株 ,其抗原性与当前流行的“O”相变异株已明显不同 ,提示今后在鉴定甲 3 (H3N2 )亚型毒株时 ,需根据毒株的来源和相特性选择适合的标准血清进行鉴定。