白细胞介素-10基因转移抑制滑膜细胞产生炎性细胞因子

目的　通过建立人白细胞介素 (IL) 10的重组逆转录病毒载体基因转移系统 ,观察IL 10对脂多糖 (LPS)诱导的大鼠关节滑膜细胞 (RSC)中炎性细胞因子的产生及其基因表达的影响。方法　将构建的重组逆转录病毒载体pLX(IL 10 )SN经包装、筛选、病毒滴度测定 ,选滴度最高的克隆 (6×10 6 CFU/ml)感染RSC :(1)应用聚合酶链反应 (PCR) ,反转录聚合酶链反应 (RT PCR)和ELISA检测IL 10基因的整合和表达 ;(2 )以RT PCR观察IL 10基因转移对LPS诱导的RSC肿瘤坏死因子 α(TNF α)的mRNA表达的影响 ,以ELISA测定IL 1β和TNF α的蛋白质表达。 结果　外源性IL 10基因已整合到靶细胞染色体DNA并有效地表达 ,它能抑制LPS诱生RSC产生IL 1β、TNF α。 结论　外源性IL 10基因可以转移到RSC并稳定表达 ,它能抑制RSC炎性效应中细胞因子的产生及其基因表达 ,为今后研究通过IL 10基因转移治疗免疫性疾病的关节损伤提供了重要的理论和实验依据。