基于水通道蛋白研究当归芍药散对肝硬化腹水大鼠的干预作用

目的:研究当归芍药散对肝硬化腹水大鼠肾脏中水通道蛋白2(AQP2)表达的影响,进而探讨其利水作用的机制。方法:健康雄性SD大鼠,随机分为6组:正常组、模型组、甘利欣组(GLX)、当归芍药散低、中、高剂量组。适应性饲养1周后,除正常组外,其余大鼠给予35%苯巴比妥溶液作为饮用水,1周后恢复正常饮水,并按以下浓度CCl4ip造模:第2～3周12%CCl4油溶液,第4～5周为14%CCl4油溶液,第6～14周为16%CCl4溶液,每周2次,给药体积为10 m L·kg-1,正常组给予等体积的生理盐水。治疗组自造模同时分别ig给予当归芍药散低、中、高剂量(相当于生药4.3,8.6,17.2 g·kg-1)的药液,给药体积按10 m L·kg-1,阳性药组给予甘利欣药液(相当于甘草酸二铵0.052 5 g·kg-1),每天1次,正常组ig给予等体积蒸馏水,连续13周。采用代谢笼收集大鼠24 h尿液,测定24 h尿量;滤纸吸收法测定大鼠腹腔积液量。免疫组化法测定各组大鼠肾脏血管加压素2型受体(V2R)及AQP2表达,Western blot法检测各组大鼠肾组织V2R及AQP2蛋白表达。结果:与正常组相比,模型组大鼠24 h尿量明显减少(P<0.05),腹腔积液量显著升高(P<0.01);大鼠肾脏V2R表达显著上升(P<0.01),肾脏组织AQP2表达量明显增多(P<0.05)。与模型组相比,甘利欣组大鼠24 h尿量显著增加(P<0.01),当归芍药散各剂量组大鼠24 h尿量明显增多(P<0.05),且呈现一定的剂量依赖性;各给药组大鼠腹腔积液量均有不同程度降低,其中当归芍药散高剂量组降低显著(P<0.05)。各给药组肾脏V2R表达较模型组均明显降低,具有统计学意义;肾脏组织AQP2表达水平较模型组呈现不同程度的下降,尤以当归芍药散高剂量组差异最为显著(P<0.01)。结论:当归芍药散能上调肝硬化腹水大鼠肾脏AQP2的表达,这可能是其发挥利水作用的机制之一。