细菌mtl-D基因的克隆及在转基因八里庄杨中的表达

运用ＰＣＲ方法克隆了大肠杆菌１－磷酸甘露醇脱氢酶（ｍｔｌ－Ｄ）基因，序列分析表明与已发表序列相比，除第 ４１６位密码子由 ＡＡＡ代替 ＣＡＴ、相应的氨基酸由 Ｌｙｓ代替 Ｈｉｓ外，其他部分均相同。该基因插入植物双元载体中，经土壤农杆菌介导导入八里庄杨［１］，经卡那霉素筛选后再经盐胁迫筛选获得一批较高耐盐性的转化植株，在附加 ０.６％ＮａＣｌ的培养基中生长良好，而对照在附加 ０．４％ ＮａＣｌ的培养基中不能存活。对转化植株进行的 ＰＣＲ检测、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交，说明外源基因已整合到染色体上并且有转录。