抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体的构建和表达

被引:14
作者
高瀛岱
熊冬生
许元富
彭晖
邵晓枫
杨纯正
朱祯平
机构
[1] 中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室,中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室,中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室,中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室,中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室,中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室,中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津,天津,天津,天津,天津,天津,天
关键词
CD3; Pgp; 基因工程抗体; 双功能抗体;
D O I
10.13345/j.cjb.2003.04.014
中图分类号
R392 [医学免疫学];
学科分类号
100102 ;
摘要
构建和表达抗CD3 抗Pgp微型双功能抗体 ,并测定该微型双功能抗体的生物学活性。采用PCR和overlapPCR方法构建抗CD3 抗Pgp微型双功能抗体 ,并用双脱氧终止法测定DNA序列 ;采用亲和层析法纯化该产物 ,并用Westernblot和分子排阻层析鉴定纯化产物 ;采用免疫荧光法、放射免疫分析法鉴定纯化产物与靶细胞的结合活性。DNA序列测定结果表明 :抗CD3 抗Pgp微型双功能抗体已构建成功 ,表达可溶性产物的产量达 2mg L以上 ,纯化产物中二聚体的比例达 90 % ,具有与Jurkat(CD3 + )和K5 62 A0 2细胞 (Pgp+ )结合的活性 ,与抗CD3ScFv及抗PgpScFv的亲合常数相当。成功地构建了抗CD3 抗Pgp微型双功能抗体 ,并获得高效表达 ,表达产物具有与相应二个靶抗原结合的活性
引用
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共 1 条
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中国医学科学院学报, 1993, (03) :157-162