人溶菌酶基因的合成和克隆

被引：13

作者：

钱世钧

于颖

田开荣

矫庆华

孟广震

机构：

[1] 中国科学院微生物研究所,中国科学院微生物研究所,中国科学院微生物研究所,中国科学院微生物研究所,中国科学院微生物研究所北京,北京,北京,北京,北京

来源：

生物工程学报 | 1994年 / 01期

关键词：

人溶菌酶; DNA合成; 基因克隆;

D O I：

10.13345/j.cjb.1994.01.007

中图分类号：

Q785 [转化及克隆];

学科分类号：

摘要：

用固相亚磷酰胺法合成了人溶菌酶的全基因,全长为409bp,它包括了编码人溶菌酶的结构基因,起始密码子ATG,终止密码子TAA、TGA,以及两端的Bam HI和SphI的识别顺序。整个基因分成24个寡聚核苷酸片段进行合成,每个片段长度分别为26至38个核苷酸,然后用两种方法酶促连接成完整的人溶菌酶基因。基因克隆到M13载体上。用点杂交和限制酶酶切分析确定阳性克隆株。用双脱氧链终止法进行序列分析,证实所合成的人溶菌酶基因序列与设计的完全一致。

引用

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