T7 启动子作用下人尿激酶原 cDNA 在大肠杆菌中的高效表达及分离纯化

被引：4

作者：

彭贵洪

马忠

薛宇鸣

陈于红

朱德煦

机构：

[1] 南京大学生物化学系南京大学医药生物技术国家重点实验室

来源：

生物工程学报 | 1997年 / 04期

关键词：

人尿激酶原，高效表达，变复性，分离纯化;

D O I：

10.13345/j.cjb.1997.04.005

中图分类号：

Q523 [脱氧核糖核酸（DNA）];

学科分类号：

摘要：

化学合成的人尿激酶原ｃＤＮＡ克隆在表达质粒ｐＥＴ１１ｄ中，在Ｔ７启动子的作用下，经０１ｍｍｏｌ／ＬＩＰＴＧ诱导，在大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）ｐＬｙｓＳ中获得表达。其表达量占菌体总蛋白的１５％，表达产物以无活性的包涵体形式存在。经体外变复性，Ｚｎ２＋选择性沉淀，抗体亲和柱层析，及Ｂｅｎｚａｍｉｄｉｎｅ亲和吸附，所表达的人尿激酶原被纯化为单一条带，其比活约１１００００ＩＵ／ｍｇ。

引用

页码：26 / 31

页数：6