经肝动脉插管注射重组腺病毒的体内基因转染效率及“靶向性”的研究

目的　将动脉插管方法应用于重组腺病毒 (Ad .LacZ)介导的标记基因体内导入 ,观察标记基因在大鼠内脏中的转染效率和维持时间。方法　 9组大鼠 ,7组于胃十二指肠动脉分别注入Ad .LacZ[2× 10 9pfu/ml(空斑形成单位 /ml) ]各 1ml,2组注入单纯培养液各 1ml,7组实验组分别于 12h、18h、72h、7d、14d、2 1d、2 8d取动物的肝、脾、肺和肾脏 ,2组对照组于 7d取上述脏器 ,采用 β 半乳糖苷酶 (X Gal)染色方法检测LacZ基因在各个脏器的表达。结果　实验组于 12h取材 ,经染色LacZ基因在肝脏中即有表达 ,而此时脾、肺、肾等内脏器官尚未见表达 ;此后 ,18h、72h、7d、14d直至 2 1d该基因在肝脏仍有表达 ,而在其他脏器如脾、肺及肾表达仅维持 14d。对照组动物各个脏器皆无染色。结论　经动脉途径注入重组腺病毒 ,其体内的表达具有器官靶向性。如经此途径注入治疗性的目的基因重组腺病毒 ,其于肝脏表达产物出现时间早 ,并且持续时间较长。本实验结果为将来应用插管方法进行肝病基因治疗奠定了理论基础