人参皂苷Rh人工抗原的合成及免疫原性分析

被引：9

作者：

王艳 ^{[1
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屈会化 ^{[2
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赛佳洋 ^{[1
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张越 ^{[1
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孙晔 ^{[1
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孔慧 ^{[1
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赵琰 ^{[1
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王庆国 ^{[1
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机构：

[1] 北京中医药大学基础医学院

[2] 北京中医药大学科学实验中心

来源：

药物分析杂志 | 2014年 / 05期

关键词：

人参皂苷Rh1; 人工抗原; 免疫原性; 高碘酸钠氧化法; 酶联免疫吸附分析法; 紫外光谱法; 薄层色谱法;

D O I：

暂无

中图分类号：

R914 [药物化学]; R96 [药理学];

学科分类号：

100705 [微生物与生化药学]; 100706 [药理学];

摘要：

目的:合成人参皂苷Rh1(GsRh1)的人工抗原,为获得其单克隆抗体奠定基础。方法:采用高碘酸钠氧化法分别合成GsRh1免疫抗原(GsRh1-BSA)和包被抗原(GsRh1-OVA);用紫外光谱法和薄层色谱法鉴定人工抗原的合成是否成功;利用GsRh1-BSA免疫小鼠制备血清多抗;通过优化封闭液和包被原工作浓度,建立酶联免疫吸附分析法(ELISA)的最佳工作条件,并检测血清中抗体效价及特异性。结果:紫外光谱和薄层色谱法鉴定结果表明,GsRh1与BSA/OVA偶联成功,免疫后小鼠血清中产生了能特异性地与GsRh1结合的抗体,效价达到1∶32000,线性范围为10～10000 ng·mL-1,经分析确定ELISA的最佳包被浓度为1∶4000,最佳封闭液为10 mg·mL-1的明胶溶液。结论:成功合成了GsRh1人工抗原,并诱发小鼠产生了抗GsRh1的抗体,可用于下一步单克隆抗体的制备。

引用

页码：770 / 774

页数：5

共 15 条

[1]

利用单克隆抗体特异性敲除技术解析中药药效物质基础的新方法[J] 赵琰;屈会化;王庆国; 中国中药杂志 2013, 17

[2]

基于黄芩苷单克隆抗体的ELISA快速检测方法的建立 [J].