肾气丸对结肠癌LoVo细胞水通道蛋白2表达的调节作用

目的:探讨肾气丸对结肠癌LoVo细胞中水通道蛋白2(Aquaporin2,AQP2)表达的调节作用。方法:将30只正常成年雄性SD大鼠随机分为正常对照组、肾气丸低剂量组(1.5g/kg)、肾气丸高剂量组(3.0g/kg),连续给药7d后,心脏取血分离制备含药血清。体外培养LoVo细胞,给予不同浓度肾气丸含药血清作用24h,采用MTT法检测细胞存活率,间接免疫荧光法结合荧光显微镜观察AQP2在LoVo细胞上的分布,运用Western blot法检测细胞中AQP2的蛋白表达,并通过RT-PCR技术检测AQP2的mRNA水平。结果:与正常大鼠血清相比,50%浓度的肾气丸低剂量含药血清、25%浓度的肾气丸高剂量含药血清均能明显增加AQP2蛋白的表达(P<0.01),其中后者的作用更为显著(P<0.05);此外,二者均能上调LoVo细胞中AQP2mRNA水平(P<0.05)。结论:肾气丸含药血清通过影响LoVo细胞AQP2的基因转录与翻译过程,提高AQP2基因mRNA与蛋白表达水平,提示肾气丸可能作用于水通道蛋白2的调控通路从而起到调节体内的水液代谢的作用。