人血管抑素在毕氏酵母中的表达及其活性测定

被引：13

作者：

辛利

张励

徐韧

张倩

叶勤

李载平

甘人宝

机构：

[1] 中国科学院上海生命科学研究院!生物化学与细胞生物学研究所

[2] 上海

[3] 华东理工大学生物反应器国家重点实验室!上海

[4] 华东理

来源：

生物化学与生物物理学报 | 2001年 / 03期

关键词：

血管抑素; 多拷贝整合; 毕氏酵母; 抑制; 内皮细胞;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q279 [癌细胞生物学];

学科分类号：

100214 ;

摘要：

利用RT PCR方法从人肝细胞癌HepG2细胞株中扩增得到编码人血管抑素 (angiostatin)的cDNA。将其插入毕氏酵母表达载体 pPIC9K中 ,转化毕氏酵母 ,获得了整合多拷贝血管抑素基因的菌株。发酵液经赖氨酸亲和柱纯化所得到的重组蛋白的产量为 2 5mg/L。蛋白质氨基酸序列分析结果与国外报道一致。重组蛋白特异地抑制bFGF刺激的牛主动脉内皮细胞的增殖 ,ED50 约为 3mg/L。

引用

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