高效液相色谱-荧光检测法快速测定血清中的色氨酸

利用色氨酸具有自然荧光的特点 ,建立了测定血清中色氨酸浓度的高效液相色谱 荧光检测分析方法。血清标本经高氯酸沉淀蛋白后取上清液进行色谱分析 ,色谱柱为Nova PakC18柱 ,流动相为 5mmol/L磷酸二氢钾水溶液 ,流速为 1mL/min ,激发波长为 2 5 4nm ,荧光检测波长为 338nm。该法检测色氨酸浓度的线性范围为 0 4 9μmol/L～ 4 90 0 0 μmol/L ,最低检测限为 0 10 μmol/L ,回收率为 97 2 %～ 98 6 % (平均值为 97 9% ) ,批内、批间相对标准偏差均小于 5 % ,苯丙氨酸、酪氨酸、5 羟色胺和 5 羟吲哚乙酸等物质对该法均无干扰。进样后 5min内可完成检测 ,整个实验过程耗时小于 30min。方法简便、快速、准确、可靠 ,适用于临床和科研工作。