芒柄花素对人非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡的影响及相关机制探讨

目的:探讨芒柄花素对人非小细胞肺癌（NSCLC）细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:培养人NSCLC细胞株A549,分别按10,20,40,80,160μmol·L-1梯度浓度加入芒柄花素,另设不含药物空白组,培养48 h后采用噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞增殖活力,利用Annexin V-FIFC/碘化丙啶（PI）双标法检测细胞凋亡情况,利用流式细胞仪检测细胞周期,利用实时荧光定量PCR（Real-time PCR）和免疫印迹法（Western blot）分别检测细胞中周期蛋白E1（cyclin E1）,B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bax）mRNA和蛋白表达。结果:40,80,160μmol·L-1芒柄花素组细胞生长抑制率和细胞凋亡率均高于空白组（P<0.05）。与空白组比较,40,80,160μmol·L-1芒柄花素组G0/G1期细胞比例上升,S期细胞比例下降,80,160μmol·L-1芒柄花素组下降更为明显（P<0.05）;40,80,160μmol·L-1芒柄花素组cyclin E1,Bcl-2 mRNA和蛋白表达量均较空白组降低,Bax mRNA和蛋白表达量升高,与40μmol·L-1芒柄花素组比较,80,160μmol·L-1芒柄花素组cyclin E1,Bcl-2 mRNA和蛋白表达量均降低,Bax mRNA和蛋白表达量升高（P<0.05）。结论:芒柄花素可抑制NSCLC细胞增殖,加速细胞凋亡发生,可能通过下调cyclin E1表达而影响细胞周期,并通过调控Bcl-2和Bax表达而促使细胞凋亡发生。