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HPV-16L1植物表达载体的构建及HPV-16L1在转基因烟草中表达的鉴定
被引：6
作者：
刘红莉
陈宏伟
李文生
雷霆
王喆之
王一理
司履生
机构：
[1] 西安交通大学生命科学与技术学院癌症研究所,西安交通大学生命科学与技术学院癌症研究所,西安交通大学生命科学与技术学院癌症研究所,西安交通大学生命科学与技术学院癌症研究所,陕西师范大学生命科学院,西安交通大学生命科学与技术学院癌症研究所,西安交通大学生命科学与技术学院癌症研究所环境与疾病相关基因教育部重点实验室,西安,环境与疾病相关基因教育部重点实验室,西安,环境与疾病相关基因教育部重点实验室,西安,环境与疾病相关基因教育部重点实验室,西安,西安,环境与疾病相关基因教育部重点实验室,西安,环境与疾病相关基因教育
来源：
关键词：
人乳头瘤病毒;
病毒样颗粒;
转基因烟草;
植物疫苗;
根瘤农杆菌;
D O I：
10.13345/j.cjb.2004.06.004
中图分类号：
R346 [];
学科分类号：
摘要：
利用PCR技术克隆人乳头瘤病毒HPV 16L1蛋白编码基因 ,将其重组于pUCmT和pBI12 1中 ,构建含HPV 16L1基因的植物双元表达载体pBI L1,L1基因由CaMV 35S启动子控制表达。采用叶盘共培育法经根瘤农杆菌介导转化烟草 (NicotianatobacumL .) ,获得HPV 16L1转基因烟草植株。经PCR及Southern杂交分析 ,HPV 16L1基因整合到烟草基因组中 ;Westernblot和ELISA分析检测显示转基因烟草叶片蛋白可与HPV 16L1单克隆抗体特异性反应 ,且定位于 5 5kD处 ,其最高表达量占烟草叶片总可溶蛋白的 0 0 76 %。小鼠红细胞凝集试验 (HA)及小鼠红细胞凝集抑制试验 (HAI)显示转基因烟草叶片蛋白可引起小鼠红细胞凝集。结果表明已成功地构建了HPV 16L1的植物双元表达载体 ,并证实了利用转基因烟草植物能够表达出HPV 16L1蛋白 ,所表达的L1蛋白具有良好的抗原性并具有介导小鼠红细胞凝集的生物活性
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