一种简易的制备和纯化质粒DNA的方法

被引:2
作者
王年
何永山
蔡良琬
机构
[1] 中国医学科学院基础医学研究所
[2] 中国医学科学院基础医学研究所 北京
[3] 北京吉林省地方病第一防治研究所进修人员
[4] 北京
关键词
质粒; RNA; 基因载体; DNA; 超离心; 缓冲液; 染色体;
D O I
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学科分类号
摘要
<正> 近年来随着遗传工程的飞速发展,DNA重组技术被广泛应用,许多实验室在制备一定纯度、产量较高、方法简便的质粒DNA方面作了许多工作。国外大多数实验室普遍采用CsCl等密度梯度超离心法,但国内受仪器限制,应用较少。我们比较了PEG沉淀质粒DNA, 羟基磷灰石法制备质粒DNA,快速抽提质粒DNA,以及M.A.K柱制备质粒DNA等方法,它们都各有利弊。本实验室对L.P.Elwell的实验条件稍作改进,温和地制备清亮裂解液并抽提质粒DNA,然后应用Sephacryl S-1000作凝胶过滤,获得了纯度高、产量大,无染色体DNA
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