肠三叶因子介导PI3K/Akt信号通路保护胃黏膜上皮细胞紧密连接

被引:13
作者
孙兆瑞
刘红梅
杨志洲
邵旦兵
林金锋
徐敏
张炜
任艺
陈鑫
聂时南
机构
[1] 南京军区南京总医院(南京大学医学院附属金陵医院)急救医学科
关键词
GES-1细胞; 肠三叶因子; 紧密连接; PI3K/Akt信号通路;
D O I
10.13201/j.issn.1009-5918.2014.07.002
中图分类号
R573 [胃疾病];
学科分类号
100201 [内科学];
摘要
目的:探讨肠三叶因子对胃黏膜上皮细胞紧密连接的保护作用,并研究PI3K/Akt信号通路在其中的作用机制。方法:体外培养GES-1细胞,分别设正常对照组,LPS组,ITF组,LPS+ITF组,LPS+ITF+LY294002组,ITF+LY294002组。正常对照组:正常培养;LPS组:加入浓度为10mg/L的LPS;ITF组:加入浓度为100μg/L的ITF;LPS+ITF组:加入浓度为10mg/L的LPS,同时加入100μg/L的ITF;LPS+ITF+LY294002组:加入浓度为10mg/L的LPS、100μg/L的ITF,同时加入PI3K/Akt信号通路的抑制剂LY294002(15μM);ITF+LY294002组:加入100μg/L的ITF,同时加入15μM的LY294002。培养48h,采用Western blot检测ITF对PI3K/Akt信号通路的作用,采用免疫荧光和Western blot检测细胞紧密连接蛋白Occludin和ZO-1的变化情况。结果:Western blot检测结果说明,与对照组相比,ITF提高了pAkt蛋白的表达水平,而LY294002抑制了ITF激活的pAkt蛋白的表达,说明ITF可以通过激活PI3K/Akt信号通路来调控GES-1细胞的生理活动。免疫荧光和Western blot结果显示LPS导致GES-1细胞的紧密连接遭到破坏,降低紧密连接蛋白Occludin和ZO-1的表达水平,而ITF可以通过激活PI3K/Akt信号通路来保护GES-1细胞的紧密连接的完整性。结论:ITF保护胃黏膜上皮细胞紧密连接的完整性,提高紧密连接蛋白的表达水平,其发挥作用的主要分子机制是通过激活PI3K/Akt信号通路来实现的。
引用
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页码:379 / 382+386 +386
页数:5
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