金黄色葡萄球菌肠毒素A的基因克隆、表达及活性试验

被引：8

作者：

胥全彬

刘传暄

马清钧

机构：

[1] 军事医学科学院生物工程研究所,军事医学科学院生物工程研究所,军事医学科学院生物工程研究所北京,北京,北京

来源：

生物工程学报 | 2003年 / 04期

关键词：

重组金黄色葡萄球菌肠毒素A; 基因克隆; 可溶表达; 活性分析;

D O I：

10.13345/j.cjb.2003.04.006

中图分类号：

Q789 [基因工程的应用];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

利用PCR从金黄色葡萄球菌标准株 (Staphylococcusaureus,ATCC13 5 65 )中克隆了金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)的基因 ,序列测定结果与报道完全一致。构建了表达载体pET SEA并获得高效表达 ,重组蛋白 (rSEA)在 3 7℃诱导时以包涵体形式存在 ,降低温度则出现可溶表达 ,可溶性rSEA占总rSEA的 5 5 %。可溶性rSEA经Ni2 + 亲和层析纯化 ,达电泳纯。通过同源模建对rSEA对SEA进行结构比较 ,结果表明尽管rSEA比野生型SEA多了 9个氨基酸但其结构并没有明显的变化。单核细胞增殖试验进一步证明了该结论 :将rSEA与SEA同外周血单个核细胞共同培养 ,两者均能有效地促进其增殖。将rSEA与体内激活的脾细胞共培养 ,则能增强脾细胞的体外抑瘤活性

引用

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