用PCR方法快速检测用拉米夫定治疗的乙型肝炎病人中HBV P基因区codon 550的变异

目的　建立一种快速特异的乙型肝炎病毒 (HBV)YMDD变异的检测方法。方法　针对HBVcodon 5 5 0位置设计 2条高度特异的的引物 ,用PCR方法进行DNA扩增。根据电泳结果可分析下列 2种情况 :(1)A741G变异型(YVDD) ;(2 )G743T变异型 (YIDD)。用该方法对 32例病人在拉米夫定治疗前 (0周 ) ,治疗中 (5 2周和 10 4周 )共 6 1份血清进行YMDD变异检测。结果　特异性 :10例病人分别做 0周和 5 2周标本codon 5 5 0特异性PCR和DNA测序。 0周血清检测结果全部为野生型 ,5 2周血清中 5例为A741G ,2例为G743T ,两种方法的检测结果完全相同。敏感性 :6 1份血清中 2例血清PCR未能检出阳性 ,codon 5 5 0变异为 2 9份 ,野生型为 30份 ,和葛兰素威康公司检测结果的符合率为98.3 %。混合变异株检测 3例病人 10 4周血清用PCR测定发现同时存在A741G和G743T两种变异株 ,其中 2例结果经多克隆测序的方法得到确证。结论　HBVcodon 5 5 0特异性PCR方法具有快速、简便和经济实用的优点 ,适用于临床拉米夫定治疗病人HBVYMDD变异的跟踪测定。