两种柑橘线粒体DNA的获得与AFLP分析

被引:19
作者
曹庆芹
伊华林
邓秀新
机构
[1] 华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室,华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室,华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室园艺林学学院,武汉,园艺林学学院,武汉,园艺林学学院,武汉
关键词
柑橘; 线粒体DNA; Southern blotting; AFLP;
D O I
10.16420/j.issn.0513-353x.2003.04.003
中图分类号
Q943 [植物细胞遗传学];
学科分类号
071007 [遗传学];
摘要
为了研究柑橘种属间线粒体基因组的遗传多样性以及温州蜜柑胞质雄性不育的分子基础 ,采用了两个柑橘品种‘国庆 1号’温州蜜柑和无核‘冰糖橙’的胚性愈伤组织作为提取线粒体的材料。不连续蔗糖梯度超速离心法纯化线粒体。提取的线粒体完整 ,具很强的荧光活性。mtDNA片段在 2 0kb左右 ,且无降解。叶绿体探针rubiscoL、核探针 4 5srRNASouthernblotting没有检测到叶绿体DNA与核DNA ,而线粒体探针apt6杂交获得一条 5kb大小的带 ,说明用此提取方法可获得无污染的mtDNA。 4对AFLP引物共得到 98条带 ,其中 14条带有多态性
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