aroA基因的克隆和优化

被引：13

作者：

何鸣

曾海燕

徐培林

叶长明

机构：

[1] 中山大学生物工程中心∥基因工程教育部重点实验室

[2] 中山大学地球与环境科学学院

来源：

中山大学学报(自然科学版) | 2002年 / 02期

关键词：

aroA; EPSP(5-烯醇式丙酮酰莽草酸-3-磷酸)合成酶,草甘膦;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q781 [目的基因的获得];

学科分类号：

摘要：

除草剂草甘膦（glyphosate ,Nphosphonomethylglycine ）的靶标酶是由aroA基因编码的EPSP （5_烯醇式丙酮酰莽草酸3_磷酸 ,5enolpyruvylshikimate3phosphate）合成酶。采用先进的基因优化技术 ,以鼠伤寒沙门氏杆菌和大肠杆菌的EPSP合成酶基因为模板 ,通过随机结合 ,交错延伸的PCR扩增过程 ,克服定点突变的局限性 ,使基因获得多位点突变 ,并使之在大肠杆菌中得到表达。对纯化后的表达产物的酶动力学性质的测定结果表明 ,获得了与作为模板的野生型相比 ,具有高得多的酶活力 (降低的Km （PEP） )和大大增强的草甘膦抗性 (升高的Ki（glyphosate） )的突变基因

引用

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