牛酪蛋白cDNA基因克隆的改建

被引：2

作者：

赵双宜

张燕君

粟翼玟

周同度

劳为德

机构：

[1] 山东大学生物系

[2] 中科院发育所

来源：

山东大学学报(自然科学版) | 1996年 / 04期

关键词：

酪蛋白基因cDNA; pBIl21.2载体; 点杂交; 基因克隆的改建;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q785 [转化及克隆];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

牛酪蛋白全长cDNA克隆pBaS1C184经Bgl Ⅰ和EcoR Ⅰ双酶切,回收其中的酪蛋白基因编码片段,与经BamH Ⅰ、SmaⅠ双酶切的植物表达载体pBI121.2分两步连接:第一步载体的BamHⅠ末端与酪蛋白基因的BglⅠ粘性末端连接;第二步用T4DNA多聚酶补平酪蛋白基因的EcoR Ⅰ末端,再与载体SmaⅠ进行平末端连接而环化,转化JM109菌株,从得到的33个转化子中,通过32P标记的酪蛋白cDNA基因为探针,点杂交筛选到一个阳性克隆。经酶切鉴定,确认酪蛋白cDNA基因编码区已正确插入到pBI121.2中。

引用

页码：448 / 453

页数：6

共 9 条

[1] 高效抗虫转基因烟草的研究 [J].

李太元 ;

田颖川 ;

秦晓峰 ;

莽克强 ;

李文谷 ;

何永刚 ;

沈蕾 .

中国科学(B辑化学生命科学地学), 1994, (03) :276-282+338

[2]

农业分子育种研究进展[M]. 中国农业科技出版社 , 周光宇等主编, 1993

[3] 高必需氨基酸转基因马铃薯的研究 [J].

王光清 ;

王蕴珠 ;

杨金水 ;

应燕如 ;

钱旻 ;

葛扣麟 .

植物学报, 1995, (08) :655-658

[4] 牛胸腺DNA与酪蛋白基因导入花生栽培种引起性状变异的研究 [J].

申馥玉 ;

王传堂 ;

苗华荣 ;

段淑芬 ;

王彩祥 ;

车克鹏 ;

邱庆树 ;

赵双宜 ;

张燕君 ;

粟翼玟 ;

周同度 .

花生科技, 1995, (03) :1-3+24

[5]

Nucleotide sequences of bovine aS1 and k-casein cDNAs. Stewart A F,et al. Nucleic Acids Research . 1995

[6]

Molecular cloning,a laboratory manual (2nd ed). J Sembrook E F,et al. . 1989

[7]

One-step preparation of E.coli competent cell. Gormen C M,et al. Molecular and Cellular Biology . 1982

[8]

Expression of a synthetic genc for improved protein quality in transformed potato plants. Yong M S,et al. Plant Science . 1989

[9] 豇豆胰蛋白酶抑制剂抗虫转基因烟草的获得 [J].

刘春明 ;

朱祯 ;

周兆斓 ;

孙宝林 ;

冯平章 ;

李向辉 .

科学通报, 1992, (18) :1694-1697

← 1 →