粒-巨噬系集落刺激因子基因在大肠杆菌中的高效表达

被引：1

作者：

汲言山

沈倍奋

王文香

陈兴

胡美茹

黎燕

王建安

马贤凯

机构：

[1] 北京基础医学研究所,北京基础医学研究所,北京基础医学研究所,北京基础医学研究所,北京基础医学研究所,北京基础医学研究所,北京基础医学研究所,北京基础医学研究所北京,北京,北京,北京,北京,北京,北京,北京

来源：

实验血液学杂志 | 1994年 / 04期

关键词：

粒-巨噬系集落刺激因子; 基因表达; 聚合酶链反应; 造血生长因子;

D O I：

暂无

中图分类号：

R346 [];

学科分类号：

摘要：

粗-巨噬系集落刺激因子(GM-CSF)是一种重要的造血生长因子,主要是刺激粒细胞和巨噬细胞大量增殖。其临床疗效显著而且副作用小。本文先从正常人外周血细胞中提取总RNA,经逆转录——PCR扩增克隆了GM-CSF之cDNA。以DNA序列分析证实与文献一致。再设计合成一对引物定向改造编码成熟GM-CSF基因的5′端:换成大肠杆菌偏性密码,并避免起始点周围形成强二级结构,把终止密码子换成TAA。将改造后的基因克隆到载体pBV220中,转化受体菌HB101,经42℃诱导高效表达出GM-CSF。表达产物约占全菌蛋白的20％,初步纯化和复性后比活性>1×10～7U/mg。

引用

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