Thermotoga neapolitana α-葡萄糖苷酶基因克隆及表达

被引:4
作者
陈丽丽
陈萍
华欣春
蒋海芹
刘琼
毕云枫
机构
[1] 吉林农业大学食品科学与工程学院
关键词
新阿波罗栖热袍菌; α-葡萄糖苷酶; 克隆; 表达;
D O I
暂无
中图分类号
Q78 [基因工程(遗传工程)];
学科分类号
071007 ; 0836 ; 090102 ;
摘要
本文拟克隆新阿波罗栖热袍菌(Thermotoga neapolitana DSM 4359)的一种α-葡萄糖苷酶基因(TNAG),其GenBank注册号为lcl27401。首先以T.neapolitana DSM 4359基因组DNA为模板,通过PCR扩增目的基因并完成T克隆,在NCBI数据库中比对结果表明:目的基因与Thermotoqa sp.RQ2等氨基酸序列相似度高于99%。再将目的基因连接至表达载体pET-32a(+),并导入大肠杆菌Rosetta中用IPTG诱导表达。SDS-PAGE显示表达蛋白的大小约为72KDa。热纯化后酶液测活反应的最适温度为80℃,最适pH在5.0左右。
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[1]  
分子克隆实验指南.[M].(美)J.萨姆布鲁克(JosephSambrook);(美)D.W.拉塞尔(DavidW.Russell)著;黄培堂等译;.科学出版社.2002,
[2]  
蛋白质技术手册.[M].汪家政;范明主编;.科学出版社.2000,
[3]  
Molecular cloning and characterization of a Candida tsukubaensis α-glucosidase gene in the yeast Saccharomyces cerevisiae.[J].B. T. Kinsella;A. Larkin;M. Bolton;B. A. Cantwell.Current Genetics.1991, 1
[4]   阪崎肠杆菌α-葡萄糖苷酶基因克隆、表达及活性研究 [J].
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孟逊 ;
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朱崇日 .
食品科学 , 2008, (02) :213-217
[5]   α-转移葡萄糖苷酶的纯化及酶学特性研究 [J].
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陈天金 .
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[6]   α-葡萄糖苷酶研究现状及进展 [J].
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陈小霞 ;
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食品与发酵工业, 2000, (03) :63-67+98