基于已有序列信息快速获得花生目的序列的方法(英文)

被引:1
作者
王传堂
杨新道
陈殿绪
张建成
刘光臻
禹山林
机构
[1] 山东省花生研究所青岛市农业生物技术重点实验室
关键词
花生; 种子特异性表达; 序列信息; 分离; 方法;
D O I
10.14001/j.issn.1002-4093.2004.03.004
中图分类号
S565.2 [花生];
学科分类号
摘要
提出了一套基于已有DNA序列信息快速获得花生目的序列的技术流程。运用花生籽仁未成熟叶片简单预处理PCR技术,根据一个种子中特异表达的基因cDNA序列设计特异性引物,用TaqDNA聚合酶进行PCR扩增,4个花生基因型中有3个得到预期长度的产物。随后取其中育种品系02 B4籽仁未成熟叶片,简单预处理后采用PyrobestDNA聚合酶作高保真扩增,得到产物后直接测序。结果表明,该基因片段与已报道的花生PSC33羽扇豆球蛋白cDNA序列表现出高度同源性。本研究为分离其编码区上下游序列奠定了基础。
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  • [1] Seed-specific, developmentally regulated genes of peanut[J] . O. G. Paik-Ro,J. C. Seib,R. L. Smith.TAG Theoretical and Applied Genetics . 2002 (2-3)