pcDNA3+转化生长因子-β1单独转染及其与pAT153+胰岛素样生长因子-1共转染兔软骨细胞的研究

目的探讨重组大鼠转化生长因子β1基因(pcDNA3+TGFβ1)单独转染及其与重组大鼠胰岛素样生长因子1基因(pAT153+IGF1)共转染兔软骨细胞后细胞增殖及所分泌的TGFβ1因子、IGF1因子、Ⅱ型胶原的变化。方法兔软骨细胞体外分别用pcDNA3+TGFβ1单转染、pcDNA3+TGFβ1和pAT153+IGF1共转染,筛选阳性克隆后,进行原位杂交、免疫组织化学、免疫荧光检测、流式细胞仪检测、3HTdR(3H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷)检测。结果基因转染组与空白组相比,TGFβ1、IGF1、Ⅱ型胶原的含量均明显提高,空白组、基因单转染组、基因双转染组软骨细胞位于S期的比例分别为5.6%、33.4%、40.1%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论基因pcDNA3+TGFβ1、pAT153+IGF1转染软骨细胞后,细胞分泌的TGFβ1、IGF1及Ⅱ型胶原显著增多,细胞增殖明显增强,上述基因转染有助于软骨细胞活力的提高;pcDNA3+TGFβ1和pAT153+IGF1双基因共转染软骨细胞后,细胞分裂增生活跃程度及分泌的TGFβ1、IGF1和Ⅱ型胶原含量高于pcDNA3+TGFβ1单基因转染,多基因共转染作为将来骨性关节炎基因治疗的方法,其治疗效果可能会优于单基因转染。