乳兔窦房结细胞的分离及鉴定

目的乳兔窦房结细胞(sinus node cell,SNC)的分离、纯化、培养与鉴定。方法选用新生新西兰乳兔5只,采用双酶解法对细胞进行消化分离,差速贴壁结合5-BrdU对分离的细胞进行纯化培养,观察SNC形态变化并采用全细胞膜片钳技术对SNC进行动作电位的记录。结果培养得到的SNC主要有3种形态:梭形、三角形与不规则形,而梭形细胞最多,搏动频率最快,符合窦房结细胞的特征。采用膜片钳技术记录10个梭形细胞的动作电位中,平均最大舒张电位为(-50.9±5.3)mV,动作电位幅度为(61.9±4.8)mV。结论采用双酶解、差速贴壁及BrdU对乳兔窦房结细胞进行消化、分离可得到纯化的SNC,此种方法得到的SNC状态活性良好,且具有典型特征的动作电位。