基于NLRP3炎性体信号通路研究桂枝芍药知母汤治疗痛风性关节炎的作用机制

目的:探讨桂枝芍药知母汤(GT)对尿酸钠致痛风性关节炎(GA)模型大鼠关节滑膜组织中炎性信号表达的影响。方法:180只雄性SD大鼠随机分配到3个实验,分别为关节滑膜免疫组化实验,酶联免疫吸附测定(ELISA)实验,蛋白质免疫印迹(Western blot)实验。各实验取大鼠60只,按体重随机分为6组,每组10只,分别为模型组,正常组,GT高、中、低剂量组(4,8,16 g·kg-1),秋水仙碱阳性药组(3×10-4g·kg-1)。实验组均ig给药,正常组、模型组给予等容积的蒸馏水,每天1次,连续给药7 d。第5天ig前,大鼠足踝关节注射尿酸钠悬液诱导GA。取大鼠关节滑膜组织,免疫组化检测Nod样受体蛋白3(NLRP3)炎性体的表达,Image-Pro Plus6.0图像分析系统测定平均积分吸光度(IA),Western blot检测凋亡相关斑点样蛋白(ASC),半胱氨酸天冬氨酸酶-1(Caspase-1)信号衔接蛋白表达,ELISA测定炎性因子白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),核因子-κB(NF-κB)表达水平。结果:造模72 h后,与正常组比较,模型组大鼠关节滑膜组织中NLRP3,ASC,Caspase-1,L-1β,IL-6,TNF-α,NF-κB表达明显升高(P<0.05),Caspase-12表达明显降低(P<0.05);与模型组比较,GT高、中剂量组NLRP3,ASC,GT各剂量组Caspase-1表达水平均显著降低(P<0.05),Caspase-12表达明显升高(P<0.05),GT各组IL-1β,IL-6,TNF-α,NF-κB表达均明显降低(P<0.05)。结论:GT治疗GA的作用机制可能与降低NLRP3,ASC,Caspase-1表达,抑制IL-1β分化成熟及NF-κB活化,降低NLRP3炎性体信号通路炎性因子表达有关。