油菜波里马胞质雄性不育相关线粒体基因orf224在大肠杆菌中的克隆和表达

被引:15
作者
赵荣敏
王迎春
范云六
机构
[1] 中国农业科学院生物技术研究中心
[2] 中国农业科学院生物技术研究中心 北京
[3] 北京
关键词
型油菜; 细胞质雄性不育; 线粒体基因; 基因表达;
D O I
暂无
中图分类号
S565.4 [油菜籽(芸薹)];
学科分类号
0901 ;
摘要
本研究设计合成引物,从油菜波里马胞质雄性不育系线粒体 DNA 上扩增出可能与育性有关的 orf224基因5′端(A 片段)和3′端(B 片段)以及全长基因(C 片段)片段,并分段克隆到pBV220和 pGEX-5X-1载体上,经序列分析证实,获得了编码224个氨基酸基因的各序列片段。各重组菌株诱导表达产物比较分析表明,只有 orf224 3′端即 B 片段融合蛋白 GST-B 得到了高效表达,其它菌株在聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)上见不到诱导的特异蛋白条带。pBV220系统表达的天然蛋白虽然用 SDS-pAGE 检测不到,但重组菌株在诱导条件下的生长受到了明显的抑制。orf224各基因片段在大肠杆菌中的表达为深入研究 orf224与雄性不育的关系提供了可能。
引用
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共 4 条
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