NGAL基因cDNA的克隆及其表达载体的构建

被引：2

作者：

熊华淇

许丽艳

李恩民

蔡唯佳

沈忠英

徐小虎

机构：

[1] 汕头大学医学院肿瘤病理研究室

[2] 汕头大学医学院生物化学与分子生物学教研室

[3] 汕头大学医学院肿瘤病理研究室广东汕头

[4] 广东汕头

来源：

肿瘤防治杂志 | 2001年 / 05期

关键词：

嗜中性粒细胞明胶酶相关lipocalin; cDNA克隆; 食管癌细胞系; 表达载体构建;

D O I：

10.16073/j.cnki.cjcpt.2001.05.004

中图分类号：

Q785 [转化及克隆];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

目的 :克隆NGAL基因的cDNA ,并构建其表达载体。方法 :应用RT PCR技术 ,从食管癌细胞系SHEEC中扩增出NGAL(neutrophilgelatinase associatedlipocalin)基因的cDNA ,并重组到中间载体pT Adv中 ,经测序和与NCBI数据库比较证实是NGAL基因的全编序列。然后把它分别插入到真核表达载体pcDNA 3和原核表达载体pGEX 4T 3中。结果 :获得了NGAL基因的cDNA全序列 ,构建了NGAL的正、反向真核表达载体pcDNA NGAL(+ - )和原核表达载体pGEX NGAL ,并在大肠埃希菌TOP10F′中成功地表达出NGAL融合蛋白。结论 :为研究NGAL基因的新功能和制备其抗体 ,进而阐明NGAL在食管癌等肿瘤中的生物学作用提供了有利工具。

引用

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