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脐血间充质干细胞肌源性诱导分化的研究
被引:9
作者:
罗凯
单根法
钟竑
金誉
张辅贤
机构:
[1] 上海第二医科大学新华医院麻醉科
[2] 上海第二医科大学新华医院心胸外科
[3] 上海第二医科大学新华医院心胸外科 上海
[4] 上海
来源:
关键词:
脐血;
脐血间充质干细胞;
诱导分化;
5-氮杂胞嘧啶核苷;
D O I:
暂无
中图分类号:
R329.2 [人体细胞学];
学科分类号:
100101 ;
摘要:
目的研究脐血间充质干细胞 (MSC)体外的采集、培养和扩增 ,探讨MSC肌源性分化的条件和能力。方法选择杂种妊娠犬 11只 ,采集适量脐带血 ,常规分离后获得单核细胞 ,分别接种于不同的培养液中进行培养和体外传代扩增。免疫组织化学检测脐血MSC表面抗原的表达 ;5 -氮杂胞嘧啶核苷 (5 aza)诱导处理脐血MSC ,观察细胞形态结构的变化及肌源性标记物的表达。结果犬脐血MSC在IMDM中生长良好 ,增殖迅速 ,每传一代细胞扩增 2 ~3倍 ,传至 7代后细胞可扩增 1.5× 10 2~2 .0× 10 3 倍 ;脐血中包含破骨细胞样和纤维母细胞样贴壁细胞 ,后者CD2 9和CD71表达阳性 ,CD11a、CD11b和CD34表达阴性 ;脐血MSC在 10μmol/L的 5 aza诱导 3周后体积延长 ,与邻近细胞形成连接 ,并表达肌节性肌动蛋白和结蛋白 ,与阳性对照结果相似。 结论脐血MSC是存在于脐血中的一类不同于造血干细胞的原始细胞 ,在体外可大量扩增 ,在诱导剂的作用下向肌源性定向分化
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