肿瘤坏死因子α及caspase-3表达与暴发性肝衰竭细胞凋亡

目的　研究肿瘤坏死因子α(TNFα)与caspase 3表达在实验性暴发性肝衰竭 (FHF)中对肝细胞凋亡的作用。方法　用脂多糖和D 氨基半乳糖制备FHF小鼠模型 ;ELISA和逆转录PCR法检测血清TNFα水平及肝组织TNFαmRNA表达 ;原位杂交法检测肝组织内caspase 3表达 ;DNA琼脂糖凝胶电泳和末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记 (TUNEL)检测肝细胞凋亡。结果　用药后 2h开始 ,TNFαmRNA表达增加 ( 0 91± 0 75 ,正常值 0 32± 0 10 ) ,血清TNFα水平升高 [( 32 0 5 0± 86 5 7)ng/L ,正常值 ( 16 6 6± 7 0 1)ng/L],caspase 3少量表达 ;8h后 ,血清ALT和总胆红素 (TBil)水平显著增加 [分别为 ( 5 6 0 6 6± 6 0 2 0 )U/L和 ( 16 3 6 6± 34 5 1) μmol/L ,正常值为 ( 2 3 5 6± 8 0 3)U/L和 ( 14 90± 4 80 ) μmol/L],caspase 3表达至最高峰 ,并出现典型的肝细胞凋亡改变 ;12h后 ,血清ALT和TBil水平达最高峰 ,caspase 3表达较 8h减少 ,肝细胞坏死和凋亡同时存在。抗TNFα单抗阻断试验后 ,肝细胞凋亡和坏死明显减轻 ,TUNEL和caspase 3表达显著减少。 结论　TNFα有促进肝细胞凋亡与坏死作用 ,肝细胞凋亡与caspase 3的激活有关 ,在时间上肝细胞凋亡先于坏死。