突变的人铜、锌超氧化物歧化酶基因的克隆、测序及表达

被引：4

作者：

施惠娟

孙建新

范立强

魏东芝

吴祥甫

袁勤生

机构：

[1] 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室生物化学研究所!上海,中国科学院上海生物化学研究所,华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室生物化学研究所!上海,华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室生物化学研究所!上海,中国科学院上海生物化学研究所

来源：

中国生化药物杂志 | 1999年 / 03期

关键词：

突变的人铜锌超氧化物歧化酶; 聚合酶链反应; 基因突变; 基因克隆和表达;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q785 [转化及克隆];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

目的：通过基因工程的方法将ｒｈＣｕ，Ｚｎ－ＳＯＤｃＤＮＡ基因改造以得到更加稳定的酶。方法：以本实验室构建的ｒｈＣｕ，Ｚｎ－ＳＯＤｃＤＮＡ为模板，利用含有突变核苷酸的引物进行ＰＣＲ扩增，将正确测定的含ｒｈＣｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ突变（ｒｈＣｕ，Ｚｎ－ＭＳＯＤ）基因的重组质粒重组到表达载体ＰＥＴ－２２ｂ（＋）中，重组质粒在大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中表达ｒｈＣｕ，Ｚｎ－ＭＳＯＤ。结果：表达产物占菌体总蛋白的３８％，具有特异性ＳＯＤ酶活性。结论：从基因突变的角度改善酶的性能不仅具有理论意义，又有一定的实用价值。

引用

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共 3 条

[1] 重组人超氧化物歧化酶化学修饰的初步研究 [J].