乳鼠成骨细胞的原代培养与鉴定

被引:17
作者
钟近洁 [1 ]
张东辉 [2 ]
许永华 [2 ]
刘开泰 [1 ]
李建瑛 [2 ]
塔拉甫托坎 [3 ]
李扬 [3 ]
高鑫 [3 ]
莫良 [3 ]
机构
[1] 新疆医科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学教研室
[2] 兰州军区乌鲁木齐总医院动物实验科
[3] 新疆医科大学基础医学-班
关键词
成骨细胞; 胶原酶; 原代培养;
D O I
暂无
中图分类号
R329 [人体组织学];
学科分类号
100107 [人体解剖与组织胚胎学(人体解剖学、组织与胚胎学)];
摘要
目的:验证及改良成骨细胞原代培养常用方法,探讨该方法的可行性和应用价值。方法:取材于出生2~3 d小鼠颅骨,以含20%胎牛血清的DMEM培养液进行培养,采用胶原酶消化法分离成骨细胞,并进行细胞接种与传代。细胞采用Gomori钙钴法染色并进行细胞形态观察,鉴定成骨细胞起源,根据细胞的生长曲线以及贴壁率观察细胞的生长情况。结果:原代培养48 h后,大量细胞贴壁生长,呈长梭形或有2~3个突起,胞质透亮、饱满,7d后细胞铺满整个平皿底面。所得细胞经Gomori钙钴法鉴定,证实为成骨细胞。细胞接种后第1个24 h为细胞潜伏适应期,第2~7个24 h生长曲线基本为线性曲线,是细胞的对数生长期。细胞贴壁主要发生在接种10 h之内。结论:采用胶原酶消化法分离培养成骨细胞是一种可靠、简便、快速的细胞原代分离培养方法。
引用
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页数:4
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