香蕉果实特异性ACC合酶基因启动子区的克隆及其功能初探

被引：10

作者：

王新力

彭学贤

机构：

[1] 中国科学院微生物研究所植物生物技术实验室!北京

来源：

生物工程学报 | 2001年 / 03期

关键词：

香蕉; 果实特异性; ACC合酶基因启动子; 瞬时表达;

D O I：

10.13345/j.cjb.2001.03.015

中图分类号：

Q943.2 [植物基因工程];

学科分类号：

摘要：

根据本实验室所获得的香蕉果实特异性ACC合酶cDNA序列 ,以改进的接头连接PCR方法通过两次步行从香蕉基因组中分别扩增并克隆了其基因 5′旁侧区近端 1 2kb和远端 1 6kb的片段。通过拼接 ,构建出含有2 5 0 5bp启动子区和转录起始位点下游 86bp的共 2 5 91bp的基因 5′旁侧区片段 ;其启发性动子区中 34至 2 8为推测的TATA盒序列 , 15 8至 146为推测的CCAAT盒 ,与其它植物基因启动子结构相类似。将 2 5kb启动子片段与 β 葡糖苷酸酶 (GUS)基因编码序列融合 ,用基因枪法将构建的嵌合基因转入香蕉叶、根和果实的细胞后 ,只在果实细胞中观察到报告基因的瞬时表达 ,从功能上证明了此 2 5kb的启动子片段具有指导报告基因在香蕉果实中特异性表达的作用。同时构建 5个含不同 5′端缺失启动子与GUS融合基因的表达载体。瞬时表达结果表明可能负责果实特异性表达的调控区存在于转录起始位点至 - 1111的启动子区中 ,而在 - 1111至 - 6 0 8区间可能存在一个正控制区

引用

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