脂肪干细胞-丝素/壳聚糖支架复合物在外泌体诱导下的体外成骨效应

目的探究成骨分化脂肪干细胞(ADSCs)来源的外泌体对ADSCs-丝素/壳聚糖三维支架复合物(ADSCs-SF/CS)的成骨效应。方法体外提取、培养和鉴定ADSCs,采用冷冻干燥法制备三维支架。将ADSCs诱导为成骨细胞,超速离心提取外泌体。将ADSCs接种于支架上,扫描电镜观察。将细胞支架复合体分为普通培养液组(阴性对照组)、成骨诱导液组(阳性对照组)、普通培养液加外泌体组(实验组a)、成骨诱导液加外泌体组(实验组b),连续培养14 d后,采用Western blotting检测成骨相关蛋白Runx2的表达量以证实ADSCs成骨分化,并通过CCK-8法及碱性磷酸酶(ALP)活性检测探究外泌体对ADSCs-SF/CS复合物中ADSCs体外增殖及成骨分化效应的作用。结果 CCK-8结果显示,实验组a与阴性对照组相比,加入外泌体有利于ADSCs的增殖,Runx2及ALP活性结果显示,实验组b与阳性对照组相比,加入外泌体可使ADSCs-SF/CS复合物中的ADSCs成骨效应显著增强。结论成骨诱导后,ADSCs来源的外泌体可诱导附着于SF/CS上的ADSCs向成骨细胞分化,并且对ADSCs的成骨具有促进效应。