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贮脂细胞TGF-β1反义基因转移及对细胞外基质合成的抑制作用
被引：11
作者：
梁志清
何振平
机构：
[1] 第三军医大学西南医院肝胆外科
来源：
关键词：
转化生长因子β,基因,反义,细胞外基质;
D O I：
暂无
中图分类号：
R394-3, [];
学科分类号：
摘要：
目的探讨ＴＧＦ β１在肝纤维化贮脂细胞激活和细胞外基质产生中的作用。以及对细胞外基质基因的表达和自身ｍＲＮＡ表达的作用。方法将ＴＧＦ β１的基因序列反向插入逆转录病毒载体ｐＬＸＳＮ，构建反义ＴＧＦ β１的逆转录病毒载体ｐＬＡＴＳＮ，用ＰＡ３１７包装细胞包装，获得高滴度的逆转录病毒。将携有反义ＴＧＦ β１ｃＤＮＡ的逆转录病毒载体ｐＬＡＴＳＮ导入人的贮脂细胞株ＬＩ９０内，选择稳定转染的贮脂细胞株培养，应用ＰＣＲ、ＲＴ ＰＣＲ检测反义基因的表达，用ＥＬＩＳＡ、免疫组织化学和原位杂交等方法检测ＴＧＦ β１和细胞外基质的产生。结果贮脂细胞株ＬＩ９０内有反义ＴＧＦ β１的表达，且其合成分泌ＴＧＦ β１和细胞外基质如ＦＮ、ＣｏｌＡ１降低。结论反义ＴＧＦ β１ＲＮＡ可以抑制贮脂细胞的激活和内源性ＴＧＦ β１和细胞外基质的产生，为抗纤维化基因治疗提供理论基础
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