目的应用反相高效液相色谱(RP-HPLC)技术,建立兔房水中乙酰唑胺的定量分析方法。方法乙酰唑胺房水样品经固相萃取后,进行RP-HPLC检测。检测条件:分析柱为C18不锈钢柱(200mm×4.6mm,5μm);流动相为0.01mol/L乙酸铵-甲醇(95∶5);流速为1.5ml/min;柱温为40℃;紫外检测器波长为265nm。结果兔房水的药物峰与杂质峰分离良好,在0.1~6.4μg/ml范围内,峰面积与浓度呈良好的线性关系,r=0.997;最低检测限为2ng/ml;在0.4、1.6、4.0μg/ml3种浓度的平均回收率为98.51±0.29%,日内和日间RSD均小于1.7%。结论建立了简便、敏感的RP-HPLC检测法,可用于乙酰唑胺的眼内药代动力学研究